HPLC液相色譜儀入門:核心使用技巧詳解

    更新時間:2024-11-28  點(diǎn)擊次數(shù):1497
      HPLC液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜及液-固色譜。由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與液相柱色譜裝置比較,具有GX、快速、靈敏等特點(diǎn)。為了保證新手也能較好地使用HPLC液相色譜儀,新手需要對其核心使用技巧有一定的了解,下面我們來具體說說。
     
      1.過濾流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
     
      2.對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
     
      3.打開HPLC工作站(包括計算機(jī)軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統(tǒng)。
     
      4.進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動菜單。
     
      5.有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manua1菜單下,先點(diǎn)擊purge, 再點(diǎn)擊start,沖洗時速度不要超過10 ml/min。
     
      6.調(diào)節(jié)流璽,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,-般不要超過2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線,觀察基線的情況。
     
      7.設(shè)計走樣方法。點(diǎn)擊file;選取select users and methods, 可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點(diǎn)擊new method。 選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括: a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,- 般2-5分鐘; b.基線歸零; c. 進(jìn)樣閥的loading - inject轉(zhuǎn)換; d. 走樣時間,隨不同的樣品而不同。
     
      8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊starto 進(jìn)樣,**的樣品均需過濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走-段基線,洗掉剩余物。
     
      9.關(guān)機(jī)時,先關(guān)計算機(jī),再關(guān)液相色譜。
     
      10.填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。
     

     

      以上就是HPLC液相色譜儀的核心使用技巧,希望能幫助大家更好地使用它。
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