HPLC液相色譜儀入門(mén)：核心使用技巧詳解

　　HPLC液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜及液-固色譜。由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與液相柱色譜裝置比較，具有GX、快速、靈敏等特點(diǎn)。為了保證新手也能較好地使用HPLC液相色譜儀，新手需要對(duì)其核心使用技巧有一定的了解，下面我們來(lái)具體說(shuō)說(shuō)。
 

　　1.過(guò)濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
 

　　2.對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
 

　　3.打開(kāi)HPLC工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀)，連接好流動(dòng)相管道，連接檢測(cè)系統(tǒng)。
 

　　4.進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
 

　　5.有一段時(shí)間沒(méi)用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manua1菜單下，先點(diǎn)擊purge， 再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10 ml/min。
 

　　6.調(diào)節(jié)流璽，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，-般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。
 

　　7.設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file;選取select users and methods， 可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊new method。 選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測(cè)器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括: a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，- 般2-5分鐘; b.基線歸零; c. 進(jìn)樣閥的loading - inject轉(zhuǎn)換; d. 走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。
 

　　8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊starto 進(jìn)樣，**的樣品均需過(guò)濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走-段基線，洗掉剩余物。
 

　　9.關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。
 

　　10.填寫(xiě)登記本，由負(fù)責(zé)人簽字。
 

　　以上就是HPLC液相色譜儀的核心使用技巧，希望能幫助大家更好地使用它。